Type de diplôme : Formation qualifiante
Formation qualifiante : Techniques d'études des interactions protéine-protéine
Domaine : Sciences, Technologies, Santé
Présentation
Objectifs
La formation, composée d’une partie théorique et d’une partie pratique, vise à explorer les interactions protéine-protéine et à initier les participant.e.s aux approches expérimentales utilisées pour rechercher de nouveaux partenaires d’une protéine candidate ou pour valider les interactions de partenaires protéiques potentiels. L’objectif de la partie théorique est de présenter la nature biochimique des interactions protéiques et d’aborder les différentes méthodes utilisées pour les analyser, telles que le double hybride dans la levure, la microscopie optique de fluorescence (co-immunolocalisation, FRET, Duolink®…), les méthodes biochimiques (co-immunoprécipitation et pontage moléculaire, capture par « GST-pulldown »…) et la résonance plasmonique de surface. Dans la partie pratique, trois approches expérimentales sont utilisées pour explorer les interactions au sein d’un complexe protéique, avec des expériences en système cellulaire et in vitro : Co-immunoprécipitation : biotinylation, pontage moléculaire par « cross-linker » et immunoprécipitation de protéines de surface cellulaire | « Proximity Ligation Assay » Duolink® | Résonance plasmonique de surface : système BIAcore
Savoir-faire et compétences
Etre familiarisé-e aux techniques d’analyse des interactions « protéine-protéine » en explorant ces interactions par différentes approches expérimentales. Apprendre à effectuer (1) une co-immunoprecipitation avec marquage et pontage moléculaire, suivie de Western blot, (2) un immuno-marquage et un PLA (Duolink®) sur cellules vivantes ou fixées, (3) concevoir une analyse par résonance plasmonique de surface.
Rythme de la formation Cours en semaine (journée)
Régime d'étude
- Formation continue non diplômante
Public(s) cible(s)
- Salarié - Profession libérale
Début de la formation18 novembre 2019
A télécharger
Organisation
Organisation de la formation
PARTIE THÉORIQUE (10H)
LES DIFFÉRENTS TYPES D’INTERACTIONS PROTÉINE-PROTÉINE
ANALYSE D’UNE INTERACTION PROTÉINE-PROTÉINE
► Les méthodes utilisées : le double hybride dans la levure, la co-immunolocalisation, le FRET, la co-immunoprécipitation et le pontage moléculaire, la capture par « GST-pulldown », la technologie Duolink®
► L’analyse quantitative en temps réel : la résonance plasmonique de surface
RECHERCHE DE PARTENAIRES PROTÉIQUES
► Par crible en double hybride dans la levure
► Approche protéomique
PARTIE PRATIQUE (25H)
INTERACTION PROTÉINE-PROTÉINE EN SYSTÈME CELLULAIRE
► Par co-immunoprécipitation : biotinylation, pontage moléculaire par « cross-linker » et immunoprécipitation de protéines de surface cellulaire
► Par la technologie Duolink® basée sur le principe du « Proximity Ligation Assay »
INTERACTION PROTÉINE-PROTÉINE EN SYSTÈME IN VITRO
► La résonance plasmonique de surface : système BIAcore
► Interaction antigène-anticorps
► Analyse en temps réel de l’interaction entre deux protéines
Des modifications mineures peuvent être apportées sous la
responsabilité de l’encadrement pédagogique
Du 18 novembre après-midi au 22 novembre 2019
4,5 jours / 35 heures
2250 €
(TVA 0% incluse)
Contrôle des connaissances
MOYENS PERMETTANT DE SUIVRE L’EXÉCUTION DE L’ACTION ET D’EN APPRÉCIER LES RÉSULTATS:
Liste d’émargement
Questionnaire de satisfaction
MODALITÉS D’ÉVALUATION:
Attestation de formation délivrée par l’université
Aménagements particuliers
MOYENS PEDAGOGIQUES ET TECHNIQUES D’ENCADREMENT
Ressources humaines :
Encadrement par des enseignant.e.s-chercheur.e.s de l’Université et des intervenant.e.s extérieur.e.s
Ressources matérielles :
Supports pédagogiques remis en version papier et sous format PDF sur clés USB.
Admission
Sont autorisés à s'inscrire
Technicien.ne.s, ingénieur.e.s et chercheur.e.s des entreprises et des collectivités dans le domaine des sciences du vivant.
Conditions d’ouverture : 6 inscriptions minimum et 12 maximum
Pré-requis
Connaissances de base en biologie générale et en biochimie des protéines ; pratique expérimentale.
Droits de scolarité
2250 €
Contact(s)
Composante(s)
UFR Sciences du Vivant
Lieu(x) de la formation
- Université Paris Diderot
Responsable(s)
Contact(s) administratif(s)
- Reine Rigault
Gestionnaire de scolarité L1/L2
UFR Sciences du Vivant Bâtiment Buffon 4, rue M-A Lagroua Weill-Hallé75013 ParisTél : 0157275923
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Standard : 01 57 27 57 27